Example Image尊龙凯时

噬菌体展示产品

信息泉源：金开瑞 作者：genecreate 宣布时间：2023-04-21 10:57:00

一、项目介绍

噬菌体展示技术通过将外源肽段和噬菌体衣壳尊龙凯时融合展收噬菌体外貌，，，举行高通量筛选及富集，，，并对所需功效的克隆举行定性剖析，，，该技术展示工具涵盖抗体、抗体片断、肽段、cDNA等。。。在对抗体库的研究中，，，噬菌体展示技术可对人和其他动物的B细胞抗体库举行体外建库筛选，，，避开了免疫和细胞融合等办法从而缩短实验周期并增添了稳固性，，，该技术还具有筛选容量大、可发酵大宗生产、要领简朴等优点。。。

01. 噬菌体随机肽库介绍

购买NEB 的 3 种随机肽库包括 7 肽库（Ph.D.-7）、12 肽库（Ph.D.-12）和含有二硫键的环 7 肽库（Ph.D.-C7C）。。。所有肽库的容量凌驾 20 亿个克隆。。。上述 3 种肽库表达的随机肽均在噬菌体次要包膜尊龙凯时 pIII 的 N 端，，，故每一个病毒粒子可以表达 5 个拷贝。。。 

02. 噬菌体抗体库建库及筛选流程介绍
 
二、噬菌体展示库应用
01. 随机肽库

  • 靶向肽药物治疗：

    癌细胞举行随机肽库筛选，，，获得高亲和力的小肽，，，应用于药物转载靶向运输，，，镌汰机体副作用。。。

  • 模拟表位筛�。。。�

    抗体举行随机肽库筛选，，，获得的多肽，，，可以推断出抗体可能识别的抗原表位。。�？？？ ？？捎糜谖粗《炯凹膊〉陌凶鹆毙蛄型撇�。。。

  • 重金属接纳：

    噬菌体多肽库筛选出可以和金属连系的肽段，，，用于重金属的接纳使用及重金属污染水质土壤的处置惩罚。。。

  • 筛选尊龙凯时激动剂和抑制剂：

    噬菌体肽库筛选出与某尊龙凯时特异性连系的多肽，，，通过相关实验验证其激活或者抑制活性的作用。。。

  • 化学新型质料研发：

    通过噬菌体随机肽库筛选与金属化合物连系的肽作为新型的粘合剂，，，以用于发明和爆发新的复合质料。。。

 
02. 抗体库

  • 细胞外貌配受体筛�。。。�

    细胞外貌尊龙凯时多为跨膜尊龙凯时，，，膜尊龙凯时难以表达，，，或者表达的尊龙凯时难以坚持准确的构象。。。用重组尊龙凯时筛选的抗体，，，可能不识别细胞表达的抗原。。�？？？ ？？梢杂孟赴苯哟涌固蹇庵猩秆〕瞿ぷ鹆钡目固�。。。

  • 药用阻断剂：

    病原体通过与某一个受体尊龙凯时连系后进入体内，，，通过筛选与受体尊龙凯时连系位点相似的表位，，，在病原体入侵之前举行预防，，，阻断病原体与受体尊龙凯时的连系。。。

  • 中息争毒剂：

    通例致毒动物的血清可举行毒液治疗，，，可是产量及治疗效果有限。。。通过噬菌体纳米抗体库筛选出与血清功效类似的中和抗体，，，使用其组织穿透力和低免疫原性，，，可提供更好的治疗效果。。。

  • 双特异性抗体：

    通过噬菌体纳米抗体库，，，使用其分子量小，，，穿透力强的特征，，，筛选出即可以靶向目的细胞，，，也可以装载药物的纳米抗体，，，用于靶向药物治疗。。。

 

 

三、报价与周期
01. 建库
序号 库种别 种属 自然库照旧免疫库 抗体基因泉源 标签(可选) 库容 周期 交付标准
1 ScFv 人、鼠、兔 自然库 外周血 E-tag/His -tag/HA ≧9次方 8-10周 ①测序报告 ；；；②建库历程的检测数据（抗体基因扩增，，，库插入效率检测，，，库多样性检测，，，其标准为：抗体基因插入比例：90%以上 ；；；库容：10^8 ；；；有用抗体基因比例：70-80% ；；；插入长度一样平常是750bp左右，，，由于每个抗体的CDR区长度差别，，，以是插入长度的指标一样平常不做详细要求） ；；；③ TG1抗体库（或者噬菌体展示抗体库） 2030 ml，，，凭证 1ml/管举行分装 ；；；
2 ScFv 人、鼠、兔 免疫库 外周血/脾脏 ≧7次方 18-24周
3 Fab 人、鼠、兔 自然库 外周血 ≧9次方 8-10周
4 Fab 人、鼠、兔 免疫库 外周血/脾脏 ≧7次方 18-24周
5 sdAb 羊驼 自然库 外周血 ≧9次方 8-10周
6 sdAb 羊驼 免疫库 外周血 ≧9次方 18-24周
7 sdAb 羊驼 半合成库 外周血 ≧9次方 8-12周
8 个性化库构建 凭证客户需求 凭证客户需求 凭证客户需求 凭证客户需求 凭证客户需求 详细评估
 
02. 筛选+测序+剖析
筛选原类型 筛选原标准 备注 交付标准
简单组分的：重组尊龙凯时、纯 化 的 天 然 蛋 白、肽段 纯度90%及以上 若需要验证其他实验，，，好比 WB 或 FACS 等，，，价钱另议 经由3-4轮筛选，，，挑取单克隆举行ELISAp检测，，，以高于空 白及阴性比照2.2倍为阳性克 隆的判断标准，，，交付至少5个克隆测序效果
混淆组分的，，，好比血清纯化的抗体 、 组织、细菌、病毒、细胞等 组织裂解液尊龙凯时抽提之后，，，总尊龙凯时含量不低于5mg/ml 经由3-4轮筛选，，，挑取单克隆举行ELISA检测，，，以高于空 白及阴性比照2.2倍为阳性克隆的判断标准，，，交付至少5个克隆测序效果

 

人源SCFV抗体库文库质控数据展示
IGKV germline distribution
Length of VK-CDR1
Length of VK-CDR3
IGλV germline distribution
 
Length of Vλ-CDR1
Length of Vλ-CDR3
IGHV germline distribution
 
Length of VH-CDR1
Length of VH-CDR3

 

四、噬菌体随机肽库筛选
 
ELISA检测效果-1
 
ELISA检测效果-2
 
泉源于猪盛行性腹泻病毒单抗，，，筛选噬菌体12肽随机肽库，，，从中选取读值较高的阳性克隆举行测序，，，获得7条差别的序列，，，通过与靶标尊龙凯时举行比对，，，对识别的详细表位举行判断。。。
阳性克盛大复率
阳性克隆OD值
 
人源化的VHH噬菌体抗体库筛选

泉源于人CD63（哺乳表达系统）重组尊龙凯时，，，筛选人源化的VHH噬菌体抗体库，，，获得13条差别的抗体序列，，，选取其中8个抗体序列，，，接纳哺乳系统举行VHH-FC抗体的重组表达量较高，，，重组抗体对筛选源举行ELISA检测，，，效价效果与筛选效果相差不大。。。

阳性克盛大复率
阳性克隆OD值
重组抗体VHH-FC表达
 
 
重组VHH-FC抗体ELISA检测
编号 1F8 1G4 2A6 2H4 3B7 4F16 4H10 4A6
抗体原液 3.1056 2.921 2.7578 2.9423 2.575 2.7465 3.0024 2.6425
0.111111111 2.8245 2.5632 2.1875 2.3023 2.3273 2.5459 2.9412 2.1218
0.736111111 2.421 2.1421 1.5251 1.7012 1.7587 1.8424 2.4102 1.6548
3.513888889 1.652 1.3215 0.9213 1.0214 1.2324 1.1251 1.6248 0.8149
1:10000 0.7212 0.5621 0.5002 0.612 0.4521 0.5101 0.8426 0.4258
FC空载体表达比照 0.031 0.1023 0.2154 0.1389 0.1027 0.0124 0.1124 0.0296

 




X
在线咨询
【网站地图】【sitemap】