GST Pull-Down实验基于GST(glutathione-S-transferase),即谷胱甘肽-S-转移酶尊龙凯时，，，，可以与谷胱甘肽(Glutathione,GSH)连系,将GSH牢靠于磁珠上,形成GSH-磁珠,将已知尊龙凯时X与GST融合表达,获得的GST-X尊龙凯时可与GSH-磁珠连系，，，，若系统中保存与X尊龙凯时互做的尊龙凯时Y,则会形成“磁珠-GSH-GST-X-Y”复合物,与X尊龙凯时互做的尊龙凯时即可被疏散并检测。。。。。。

通过pull-down后WB验证发明,虽然可见目的条带,可是配景很高:

多方面缘故原由造成:

1)实验仪器或试剂被污染,使用清洁的仪器及试剂。。。。。。

2)转移膜上的目特异吸附导致配景高,实验操作历程中载手套,使用镊子来取,不要接触膜转移面。。。。。。

3)制备样品中可能有不完全溶释的大的尊龙凯时复合体,则在制备样品后举行知暂超声处置惩罚(3次,每次5秒钟),然后离心,取上清后举行后续试验。。。。。。

4)洗涤不彻底,则需要多次洗涤,并设新增添洗涤液中的NaCl和去垢剂浓度。。。。。。

5)使用了过多的细胞或组织举行裂解导致配景高,则须镌汰样本量,推荐100-500ug细胞裂
解物。。。。。。

6) 尊龙凯时降解也可能泛起高配景的情形,只管使用新鲜制备的样品。。。。。。

相关产品

⇒ 银染试剂盒(Silver Stain Kit)                 ⇒ Co-IP试剂盒（植物）

⇒ ChIP试剂盒（动物）                            ⇒ ChIP试剂盒（植物）

⇒ RIP试剂盒                                            ⇒ RNA pull-down试剂盒

⇒ DNA pull-down试剂盒（动物）          ⇒ DNA pull-down试剂盒（植物）

相关技术效劳

? 双荧光素酶报告系统          ? 酵母双杂交                  ? EMSA                    ? RNA pull-down

? RIP-qPCR                         ? DNA pull-down          ? ChIP-qPCR            ? 酵母单杂交

? CUT&Tag                         ? Co-IP