实验原理
DNA pull down 技术是体外研究DNA与尊龙凯时质互作的有力工具。。。该技术针对目的区域设计特异性DNA探针并经由脱硫生物素标记,标记后探针可以和偶联在磁珠上的链霉亲和素亲和连系,再与总尊龙凯时提取物举行孵育,,,,,有互作的尊龙凯时质可以和DNA探针特异性连系,形成磁珠-DNA探针-尊龙凯时复合物,洗涤去除非特异性连系的尊龙凯时质,再经由洗脱获得目的DNA探针-尊龙凯时质复合物,最后通过Western Blot或质谱(MS)判断尊龙凯时质类型。。。其原理图如1.1:

实验流程


试剂盒组分

常见问题与解答
Q:通过pull-down后银染验证发明,,,,,没有想要的目的条带?
1)有可能是样品被尊龙凯时酶降解,,,,,对应的策略是需要添加尊龙凯时酶抑制剂,,,,,所有操作坚持 4℃以下冰上操作并避免冻融;;;;
2)有可能是加入生物素标记DNA量缺乏,,,,,可以增添生物素标记DNA量;;;;
3)裂解液盐碱度太高,,,,,需用低盐碱度的裂解液;;;;
4)加入细胞裂解液不敷,,,,,可以增添细胞裂解量。。。
相关产品
⇒ 银染试剂盒(Silver Stain Kit) ⇒ Co-IP试剂盒(植物)
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相关技术效劳
? 双荧光素酶报告系统 ? 酵母双杂交 ? EMSA ? RNA pull-down
? RIP-qPCR ? DNA pull-down ? ChIP-qPCR ? 酵母单杂交
尊龙凯时


